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| 稳定表达人VEGF165的NIH/3T3细胞株的筛选与鉴定 |
| 汤苏阳;谢芳;杨力;郑岩;夏炜;易成刚;陈晓芳 |
| 武警总医院烧伤整形科,北京,100039;辽宁医学院,锦州,121001;第四军医大学西京医院整形外科,西安,710032 |
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| Screening and identificating of NIH/3T3 cell strains to VEGF165 mediated by lentiviral vectors |
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摘要 目的 培养NIH/3T3细胞,并进行慢病毒载体介导的VEGF165基因转染,为建立转基因小鼠血管瘤模型奠定基础.方法 采取贴壁培养法分离培养NIH/3T3细胞,细胞随机分为3组,分别为Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体转染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组,转染后72 h荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白的表达,流式细胞仪分选后用ELISA方法检测VEGF165外分泌.结果 ELISA 检测转染后小鼠NIH/3T3细胞,Lenti-VEGF165-EGFP 重组慢病毒载体感染组、Lenti-EGFP慢病毒转染组和未转染组培养上清中VEGF165浓度分别为(205±15)、0、0 ng/L(P<0.05) 结论 NIH/3T3细胞获得慢病毒载体介导的VEGF165表达基因修饰且稳定传代,为下一步血管瘤动物模型研究奠定了基础.
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| 关键词 ：
小鼠成纤维细胞,
VEGF165基因,
慢病毒,
转染
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收稿日期: 2009-12-05
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2010, Vol. 21 
