患者, 男, 50岁, 突发左侧头痛10 d、右侧肢体活动不利进行性加重7 d入院。无眩晕、呕吐、视物模糊、抽搐等伴随症状。体检神志清醒、回答切题, 不能自立。双侧瞳孔等大等圆、对光反射灵敏, 计算力、理解力、定向力、记忆力正常。MRI检查提示左侧顶叶长圆形占位(考虑脓肿), 4.1 cm× 3.1 cm× 3.6 cm, 左侧侧脑室受压。脑脊液检查潘氏实验阳性, 白细胞数1245 M/L, 多核细胞占85%。将无菌抽取的脓性脑脊液进行细菌分离与鉴定。

1.2.1 主要试剂 巧克力平板、羊血琼脂平板平板购自英国Oxoid 公司, 药敏纸片、Ⅴ 因子、Ⅹ 因子、Ⅴ +Ⅹ 因子、 β - 内酰胺酶检测试剂等均为英国Oxoid 公司产品。

1.2.2 鉴定 无菌抽取的脓性脑脊液分别进行肉汤培养基增菌培养和直接划线接种血平板、哥伦比亚巧克力平板, 放入5%~10% CO₂培养箱, 37 ℃培养18~24 h后挑取可疑菌落进行分离鉴定; 将分纯后的菌株使用生物梅里埃Vitek 2-Compact全自动细菌鉴定仪和嗜血杆菌配套鉴定卡进行鉴定; 采用药物纸片扩散法(K-B法) 进行抗生素敏感试验, 质控菌株为流感嗜血杆菌ATCC 49247。菌株β -内酰胺酶的测定采用头孢硝噻吩纸片法, 将菌落涂布于浸湿头孢硝噻吩的纸片上, 10 min 内观察结果, 纸片变为红色, 即判断为β -内酰胺酶阳性菌株, 否则为阴性。之后进行16 s rRNA 序列测定。

1.3.1 菌落形态 35 ℃培养24 h后观察菌落, 血平板出现针尖样菌落, 继续培养48 h, 菌落增至0.5 mm左右, 灰白色、无溶血。置于5% CO₂孵育箱的巧克力平板培养24 h 后, 菌落呈现为黄色不透明、表面出现粗大凸起。肉汤培养基中形成颗粒沉淀, 管壁形成的黏性菌膜不易剥落。生理盐水涂片, 染色镜检可见短小规则的杆菌。

1.3.2 药敏试验 纸片法测定β - 内酰胺酶为阴性, 对四环素、复方新诺明耐药, β - 内酰胺类如氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢呋辛、氨曲南、美罗培南、亚胺培南均为敏感, 对阿奇霉素、左氧氟沙星、氯霉素也敏感。

1.3.3 16 s RNA序列测定 经过GenBank和核糖体工程数据库的16 s RNA序列的比对, 与嗜沫聚生杆菌同源性为99.8%, 最终确定为嗜沫聚生杆菌完善检查、预防性抗感染治疗后全麻下行左顶叶开颅脓肿清除术+去骨襻减压术, 手术顺利, 术后美罗培南抗感染治疗。手术后1周复查脑脊液常规正常, 3周后复查CT、磁共振见脓肿消失, 痊愈出院。