引用本文
曾滨阳, 孙玉坤, 史丽丽, 康景佳, 赵兴, 黄海东, 张珊珊, 杨月丽. 二甲双胍联合利拉鲁肽对多囊卵巢大鼠炎性因子及性激素水平的影响[J]. 武警医学, 2018,29(4): 371-373
ZENG Binyang, SUN Yukun, SHI Lili, KANG Jingjia, ZHAO Xing, HUANG Haidong, ZHANG Shanshan, YANG Yueli. Effect of metformin combinated with liraglutide on changes of inflammatory factors and hormonal readiness in PCOS rats[J]. Medical Journal of the Chinese People's Armed Police Forces, 2018,29(4): 371-373  
Permissions
Copyright©2018, 《武警医学》编辑部
二甲双胍联合利拉鲁肽对多囊卵巢大鼠炎性因子及性激素水平的影响
曾滨阳, 孙玉坤, 史丽丽, 康景佳, 赵兴, 黄海东, 张珊珊, 杨月丽
110034 沈阳,武警辽宁总队医院药剂科
通讯作者：杨月丽,E-mail: liyueyang@163.com

作者简介:曾滨阳,本科学历,主管药师。

收稿日期: 2017-12-08
摘要

目的 研究二甲双胍联合利拉鲁肽对经脱氢表雄酮诱导的多囊卵巢(PCOS)大鼠外周血清炎性因子及性激素水平的影响。方法 将80只PCOS(经脱氢表雄酮诱导)大鼠随机分为对照组( n=40)和干预组( n=40)。对照组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg/kg·d)灌胃,干预组大鼠每天给予二甲双胍(270 mg/kg·d)灌胃+利拉鲁肽(5 μg/kg·d)皮下注射, 连续治疗28 d。治疗结束后测定两组大鼠外周血清炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)]、激素水平[卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、睾酮(T)]。结果 治疗后两组大鼠外周血清IL-6(23.88±7.32)pg/ml、TNF-α(13.24±2.23)ng/L、CRP(1.10±0.19)mg/L、LH(6.57±1.37)mIU/ml、LH/FSH(1.17±0.28)、E2(1.11±0.18)pg/ml、T(12.21±1.32)ng/dL均较治疗前有所降低且差异有统计学意义( P<0.05),干预组低于对照组,差异有统计学意义( P<0.05);治疗后两组大鼠FSH (5.63±0.77) mIU/ml较治疗前升高,差异有统计学意义( P<0.05),干预组高于对照组,差异有统计学意义( P<0.05)。结论 二甲双胍联合利拉鲁肽能很好的降低PCOS大鼠外周血清炎性因子浓度,改善激素水平,为临床实践提供一定的指导。

关键词: 二甲双胍; 利拉鲁肽; 多囊卵巢综合征; 炎性因子; 激素水平
中图分类号:R977.12
Effect of metformin combinated with liraglutide on changes of inflammatory factors and hormonal readiness in PCOS rats
ZENG Binyang, SUN Yukun, SHI Lili, KANG Jingjia, ZHAO Xing, HUANG Haidong, ZHANG Shanshan, YANG Yueli
Liaoning Provincial Crops Hospital of Chinese People’s Armed Police Force,Shenyang 110034,China
Abstract

Objective To study the effect of metformin combined with liraglutide on changes of inflammatory factors and hormonal readiness in polycystic ovary syndrome (PCOS) rats induced by dehydroepiandrosterone.Methods Eighty rats with PCOS that was induced by dehydroepiandrosterone were randomly divided into control group ( n=40)and intervention group ( n=40). The control group was given by ig melbine (270 mg/kg·d), and the intervention group was given by ig melbine (270 mg/kg·d) + lumbar injection liraglutide (5 μg/kg·d). The treatment lasted 28 days. Before and after treatment, the changes of interleukins-6(IL-6), tumour necrosis factor-α(TNF-α) , C-reactive protein (CRP), follicule-stimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH), LH/FSH, estrogen (E2), and testosterone (T) were observed.Results After treatment, IL-6 was(23.88±7.32) pg/ml, TNF-α(13.24±2.23) ng/L, CRP(1.10±0.19) mg/L,LH(6.57±1.37) mIU/ml, LH/FSH(1.17±0.28), E2(1.11±0.18) pg/mL, and T(12.21±1.32) ng/dL, which were all lower than before treatment in both groups ( P<0.05), while FSH(5.63±0.77) mIU/ml was higher than before treatment in both groups ( P<0.05).Conclusions Metformin combined with liraglutide can reduce the concentration of inflammatory factors and hormonal readiness, which can facilitate clinical practice.

Keyword: metformin; liraglutide; polycystic ovary syndrome; inflammatory factor; hormonal readiness

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)常伴有月经紊乱、高雄激素、胰岛素抵抗等表现, 在高雄激素的长期刺激下易出现子宫内膜癌, 胰岛素抵抗易诱发糖尿病[1]。PCOS的发病率(育龄期妇女)为5%~10%, 胰岛素抵抗、高雄激素血症是其相关并发症的核心点所在, 既往PCOS仅仅被认为是一种激素紊乱状态, 但是近年来的研究证实PCOS同时存在慢性炎性反应, 慢性炎性反应是激素紊乱的启动因素, 能诱发胰岛素抵抗、卵巢多囊样改变、雄激素分泌升高[2]。此外, 长期临床治疗经验显示该类患者进行抗炎药物干预治疗能很好的纠正激素水平紊乱状态、糖脂代谢[3]。利拉鲁肽是胰高血糖素样肽-1(glucagon likepeptide-1, GLP-1)类似物, 是一种新兴降糖药物, 有着类似于二甲双胍的纠正胰岛素抵抗样作用, 对肥胖型2型糖尿病患者降低体重的起效较二甲双胍更快[4]。既往研究证实利拉鲁肽能改善控制卵巢表面炎性反应来纠正PCOS大鼠的激素紊乱及其糖脂代谢异常, 且对大鼠体重无任何影响[5]。本研究通过对利拉鲁肽联合二甲双胍对PCOS大鼠临床疗效进行观察, 以更好地指导临床实践。

1 材料与方法
1.1 实验动物

选择100只近交系健康性成熟的Wistar雌性大鼠(大连医科大学实验动物中心提供); 周龄8~10周, 体重210~230 g, 成功造模成PCOS大鼠80只, 按照随机数字表法分为对照组和干预组, 每组40只, 最后顺利完成研究的大鼠67只(对照组33只, 干预组34只), 顺利完成研究的大鼠治疗前基本资料差异无统计学意义(P> 0.05, 表 1)。

表1 完成研究的两组多囊卵巢大鼠造模前基本情况分析 ( x̅± s; n; %)
1.2 主要试剂

二甲双胍(原料药)由美国百时美施贵宝公司提供; 注射用脱氢表雄酮为武汉华美科技集团有限公司产品; 利拉鲁肽注射液为丹麦诺和诺德制药有限公司生产。

1.3 主要仪器

ASD-310S型低温离心机为美国Sigma公司产品。

1.4 方法

1.4.1 PCOS大鼠动物模型的建立 参照文献[6]方法建立PCOS大鼠动物模型。

1.4.2 PCOS大鼠处理 (1)大鼠处理:对照组大鼠给予灌胃二甲双胍粉末[270 mg/(kg· d)], 灌胃前用0.9%氯化钠注射液配成糊状, 并在背部注射相同体积的0.9%氯化钠注射液, 干预组大鼠在给予二甲双胍灌胃的基础上, 同时给予背部皮下注射利拉鲁肽注射液[5 μ g/(kg· d)], 注射前用10倍的0.9%氯化钠注射液稀释。干预组与对照组均连续给药28 d(相当于7个动情期), 在给药期间两组大鼠均给予颈背部皮下注射脱氢表雄酮按照6 mg/(100 g· d)(防止大鼠恢复排卵)[4]; (2)指标检测:治疗前后抽取两组大鼠尾缘静脉血进行相关指标的检测, 炎性因子[白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α )、C反应蛋白(CRP)]、激素水平[卵泡雌激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、睾酮(T)]。检测方法均严格按照试剂盒说明进行。注:根据人与大鼠体重比进行换算得出大鼠给药剂量。

1.5 统计学处理

采用SPSS13.0软件, 计量资料以 x̅± s表示, 采取t检验, 以P< 0.05为差异有统计学意义。

2 结 果
2.1 炎性因子检查结果

与治疗前比较, 两组大鼠治疗后IL-6、TNF-α 、CRP水平均降低, 差异有统计学意义(P< 0.05); 治疗前两组IL-6、TNF-α 、CRP水平差异无统计学意义, 干预组治疗后低于对照组, 差异有统计学意义(P< 0.05, 表2)。

表2 两组多囊卵巢大鼠治疗前后外周血清炎性因子水平比较( x̅± s)
2.2 激素水平检查结果

与治疗前比较, 两组大鼠治疗后LH、LH/FSH、E2、T水平均降低, FSH水平升高, 差异有统计学意义(P< 0.05); 治疗前两组LH、LH/FSH、E2、T、FSH水平差异无统计学意义, 干预组治疗后LH、LH/FSH、E2、T低于对照组, FSH高于对照组, 差异有统计学意义(P< 0.05, 表3)。

表3 两组多囊卵巢大鼠治疗前后外周血清激素水平比较
3 讨 论

目前, 对PCOS的发病机制仍存在较大争议, 但对激素紊乱、慢性炎性反应、胰岛素抵抗这三点已经达成共识, 且三者间相互影响, 在疾病的发生、发展中起着重要作用[7]。二甲双胍是治疗PCOS的较常用药物, 能改善胰岛素抵抗, 纠正血脂代谢异常、炎性反应[8]。近年来, 随着GLP-1类药物在PCOS治疗中的作用被发现, 其应用越来越广泛[4]。利拉鲁肽是一种肠促胰岛素效应的新一代降糖药物, 通过刺激葡萄糖依赖的胰岛素合成和分泌从而改善胰岛β 细胞功能。与此同时, 它能降低胰岛血糖素分泌、抑制食欲, 与传统胰岛素和磺脲类降糖药相比, 它不增加体重, 作用效果与二甲双胍相似, 但对体重的影响较二甲双胍的作用更早[4]。

李雪侠等[5]发现, 二甲双胍联合利格列汀可很好地改善PCOS患者卵巢排卵功能、激素紊乱、血脂代谢异常和炎性反应。PCOS被认为是一种亚临床炎性反应, 它不同于传统的急慢性炎性反应, 较少出现常见的红肿热痛炎性反应, 也无明显的全身症状, 但外周血清炎性因子异常。亚临床炎性反应能导致全身毛细血管内皮损伤继而出现动脉粥样硬化, 损伤胰岛β 细胞导致胰岛素抵抗, 损伤卵巢导致多囊样改变及激素分泌异常, 因此改善炎性反应是治疗的关键[9]。唐侨飞等[3]发现, PCOS患者外周血清CRP浓度明显高于健康人, 且有的认为IL-6作为一种广泛表达的前炎症细胞因子, 在肥胖型PCOS患者外周血清中浓度较高, 与胰岛素抵抗指数呈正相关[10]; PCOS患者外周血清CRP、TNF-α 、IL-6与LH呈正相关, 而与FSH无相关关系[11]。

本研究通过建立PCOS大鼠模型, 将二甲双胍与利拉鲁肽联合使用进行药物治疗干预, 以研究其对炎性因子、激素水平的影响, 以证实两种药物能否充分发挥其各自优势而达到其治疗的目的。结果显示:经过治疗后外周血清CRP浓度均低于治疗前(P< 0.05), 且干预组低于对照组(P< 0.05), 结果与唐侨飞等[3]应用叶酸治疗PCOS患者后外周血清CRP浓度降低一致。CRP与IL-6在两组大鼠中经过28 d治疗后均降低(P< 0.05), 且干预组低于对照组(P< 0.05)。治疗后两组大鼠外周血清LH、LH/FSH、E2、T水平均低于治疗前(P< 0.05), 且干预组低于对照组(P< 0.05); 治疗后两组大鼠外周血清FSH水平高于治疗前(P< 0.05), 且干预组高于对照组(P< 0.05)。本研究通过PCOS大鼠模型实验证明联合用药有效, 为临床实践提供了一定的指导。今后将进一步开展临床研究, 通过联合用药, 降低炎性因子、改善激素紊乱, 以达到更好的治疗效果。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 刘明慧, 刘英, 王树玉, 等. 控制性超排卵治疗对多囊卵巢综合征患者卵母细胞质量的影响[J]. 中国优生与遗传杂志, 2014, 22(1): 97-99. [本文引用:1]
[2] 李雅琪, 张瑜, 廖国芳, 等. 多囊卵巢综合征患者慢性炎症反应及糖脂代谢异常的干预治疗[J]. 山西医药杂志, 2012, 41(10): 1032-1034. [本文引用:1]
[3] 唐侨飞, 吴成勇, 杨满, 等. 叶酸对肥胖型多囊卵巢综合征患者炎症因子及糖脂代谢的影响[J]. 中国医学创新, 2016, 13(8): 56-59. [本文引用:3]
[4] 张洁, 赵媛媛, 周慧敏, 等. 利拉鲁肽对血糖控制不佳的2型糖尿病患者胰岛β细胞功能及血糖波动的影响[J]. 中国糖尿病杂志, 2015, 23(6): 527-529. [本文引用:4]
[5] 李雪侠, 陈刚, 王锋. 二甲双胍联合利格列汀治疗多囊卵巢综合征62例疗效观察[J]. 山东医药, 2015, 55(33): 65-67. [本文引用:2]
[6] 付玉玲, 王燕, 周春. 青春期多囊卵巢综合征动物模型的实验研究[J]. 武汉大学学报(医学版), 2007, 28(6): 726-728. [本文引用:1]
[7] Kelly C C, Lyall H, Petrie J R, et al. Low grade chronic inflammation in women with polycystic ovarian syndrome[J]. J Clin Endocrinol Metab, 2001, 86(6): 2453-2455. [本文引用:1]
[8] Yang S, Lv Q, Luo T, et al. Metformin inhibits expression and secretion of PEDF in adipocyte and hepatocyte via promoting AMPK phosphorylation[J]. Mediators Inflamm, 2013, 65(8): 429-438. [本文引用:1]
[9] 王泽, 石玉华. 多囊卵巢综合征与慢性炎症因子[J]. 实用妇产科杂志, 2014, 30(5): 339-341. [本文引用:1]
[10] Vgontzas A N, Trakada G, Bixler E O, et al. Plasma interleukin 6 levels are elevated in polycystic ovary syndrome independently of obesity or sleep apnea[J]. Metabolism, 2006, 55(8): 1076-1082. [本文引用:1]
[11] 李琦, 胡昌华, 张婧. 胰岛素抵抗的多囊卵巢综合征患者炎性因子与性激素的相关性探讨[J]. 检验医学与临床, 2015, 12(11): 1622-1623. [本文引用:1]