引用本文
李晨, 姬静璐, 王玉, 魏继红, 李朝英, 李少华, 安娜. 外周血hs-CPR、CD11b阳性细胞和CD64阳性细胞对早产儿早期感染的诊断价值[J]. 武警医学, 2018,29(5): 480-482
LI Chen, JI Jinglu, WANG Yu, WEI Jihong, LI Zhaoying, LI Shaohua, AN Na. Diagnostic value of peripheral hs-CPR,CD11b-positive cells and CD64-positive cells in early infections among premature children[J]. Medical Journal of the Chinese People's Armed Police Forces, 2018,29(5): 480-482  

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外周血hs-CPR、CD11b阳性细胞和CD64阳性细胞对早产儿早期感染的诊断价值
李晨, 姬静璐, 王玉, 魏继红, 李朝英, 李少华, 安娜
071000 保定,河北大学附属医院儿科
通讯作者：安 娜,E-mail: 1069201989@qq.com

作者简介:李 晨,本科学历,主治医师。

收稿日期: 2017-12-06
摘要

目的 比较流式细胞仪分析指标与传统感染指标在早产儿感染早期诊断中的应用价值。方法 选择我院住院早产儿72例,依据诊断结果分为感染组34例,非感染组38例。采用流式细胞仪检测CD11b和CD64,免疫比浊分析法测定hs-CPR,光化学染色检测血小板,全自动五分类血细胞分析仪检测白细胞(以后用WBC代表),统计分析。结果 感染组CD11b、Hs-CRP和CD64显著高于非感染组( t=8.88, P<0.01; t=22.62, P<0.01; t=24.79, P<0.01);CD11b灵敏度为0.90,特异性为0.98,阳性预测值为0.98,阴性预测值为0.98。结论 外周血CD11b阳性细胞对早产儿早期感染的诊断价值高于hs-CPR和CD64阳性细胞。

关键词: 流式细胞仪; Hs-CRP; CD11b; CD64; 早产儿感染
中图分类号:R722
Diagnostic value of peripheral hs-CPR,CD11b-positive cells and CD64-positive cells in early infections among premature children
LI Chen, JI Jinglu, WANG Yu, WEI Jihong, LI Zhaoying, LI Shaohua, AN Na
Department of Pediatrics, the Affiliated Hospital of Hebei University, Hebei Baoding 071000, China
Abstract

Objective To compare the applicability of flow cytometry analysis indexes and the traditional indexes in early diagnosis of infected preterm children.Methods Seventy-two cases of preterm children treated in our hospital were divided into the infected group and normal group based on the diagnosis.CD11b and CD64 of these patients were detected with flow cytometry, hs-CPR with immunoassays, platelet with photochemical staining turbidimetric assay, WBC analyzed with a full-automatic hematology analyzer.Statistical analysis was conducted.Results There was no significant difference in general information between the two groups of patients ( P> 0.05).CD11b, Hs-CRP and CD64 in the infected group were significantly higher than those in the normal group ( t=8.88, P<0.01; t=22.62, P<0.01; t=24.79, P<0.01). The sensitivity of CD11b was 0.90, the specificity was 0.90, the positive predictive value was 0.98 and negative predictive value was 0.98.Conclusions The diagnostic value of CD11b-positive cells is higher than that of Hs-CPR and CD64-positive cells for early infections among premature children.

Keyword: flow cytometry; Hs-CRP; CD11b; CD64; infection in premature children

近年来, 早产儿发生率逐年上升, 发达国家发生率可达5%~7%, 我国早产儿发生率也日渐接近欧美国家水平[1]。早产儿由于出生体重低、免疫功能发育不完全, 较正常婴儿更容易发生感染。低出生体重儿就有可能出现住院时间的延长, 慢性肺部疾病的发生和神经系统发育的异常状况 [2]。然而, 新生儿的感染发病情况难以察觉, 且发展迅速, 患儿可迅速出现脓毒性休克和弥散性血管内凝血等。早产儿感染防治是早产儿管理的重要环节。目前, 血液细菌培养为早产儿感染的金标准, 但其有显著的缺陷, 如阳性率低、费时、结果滞后等[3], 因此筛查出一种灵敏、快速的感染指标具有重要意义。本研究中采用流式细胞仪检测早产儿感染取得一定成果。

1 对象与方法
1.1 对象

选择我院儿科的早产儿共72例, 性别分布为:男早产儿47例, 女早产儿25例, 胎龄平均为(31.06± 0.73)周, 平均出生体重为(1683± 366)g。根据诊断标准将所有新生儿分为感染组和非感染组, 其中感染组早产儿34例, 非感染组为38例。在感染组的34例早产儿中, 包括了15例败血症, 14例细菌性肺炎和5例坏死性小肠结肠炎。新生儿的败血症诊断是参照《新生儿败血症诊疗方案》2003年版, 坏死性小肠结肠炎与感染性肺炎的诊断是参照《实用新生儿学》第 3 版 [4]。

1.2 主要仪器和试剂

SYSMEX XT-2000i 全自动五分类血细胞分析仪(日本希森美康公司); 全自动生化分析仪日立7600-20; FACS Calibur流式细胞仪; -80 ℃低温冰箱; 全自动酶标仪(KHB ST-360)(上海科华生物有限公司) ; hs-CRP测定试剂盒(迈克生物公司); CD11b、 CD64抗体(美国BD公司)。

表1 两组早产儿一般资料比较(n; %)
1.3 方法

早产儿有疑似感染时, 24 h内取外周全血3 ml, 0.5 ml用于血常规检查, 1 ml分离血清用于血清C-反应蛋白的检测, 0.5 ml抗凝血用于流式检测, 采用FACS Calibur流式细胞仪检测CD11b和CD64, 免疫比浊分析法测定hs-CPR, 光化学染色检测血小板, 全自动五分类血细胞分析仪检测白细胞。

1.4 统计学处理

采用SPSS 18.0软件对数据进行统计学分析, 计量资料用 x̅± s表示, Hs-CRP用非参数Mann-Whitney检验, 以P< 0.05为差异有统计学意义。通过制作hs-CRP、CD64%的 ROC曲线, AUC曲线反映标记物准确度。利用最佳截取值的方法, 对标志物单独使用的敏感性和特异性、阳性预测值和阴性预测值进行计算。

2 结 果
2.1 两组检测指标比较

两组在WBC和PLT无统计学差异(P> 0.05); 感染组CD11b、Hs-CRP和CD64显著高于非感染组(t=8.88, P< 0.01; t=22.62, P< 0.01; t=24.79, P< 0.01, 表2)。

表2 两组早产儿检测指标比较( x̅± s)
2.2 两组CD11b、Hs-CRP、CD64三项指示物的最佳截断值、AUC、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和95%置信区间

AUC曲线下面积CD11b> CD64> Hs-CRP; 敏感性CD11b> CD64> Hs-CRP; 特异性CD11b> CD64> Hs-CRP; 阳性预测值CD11b> Hs-CRP> CD64; 阴性预测值CD11b> Hs-CRP> CD64。见表3和图1。

表3 两组患者CD11b、Hs-CRP、CD64三项指示物的最佳截断值、AUC、敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值和95%置信区间

图1 CD11b、Hs-CRP和CD64的ROC曲线

3 讨 论

由于孕周32后, 胎儿才逐步接受母亲的免疫球蛋白, 因此, 早产儿一般表现为免疫力低下, 血清缺乏调理素, 细胞吞噬功能差, 表皮屏障功能比较差, 患儿非常容易受到各种病原体的侵袭, 导致许多不良结果的发生, 比如坏死性肠炎、感染性肺炎或者败血症 [5]。早产儿细菌早期感染无明显特征, 诊断较困难。但是感染一旦发生, 病情进展相当快速, 有可能在几小时内出现休克和弥散性血管内凝血等恶性反应 [6]。因此, 对早产儿感染快速而准确的检测具有非常重要的临床意义。

本研究分别检测了患儿的WBC、PLT、CD11b、Hs-CRP和CD64, 发现WBC和PLT在感染组和对照组无差异(P> 0.05)。WBC是最常用的实验室感染指标, 但据国外研究显示对严重细菌感染患儿进行WBC计数, 感染组和非感染组无统计学差异[7], 本研究取得一致结果, 这可能是由于许多非感染性疾病都可导致白细胞的计数增高。血小板(PLT)在伤口愈合、炎性反应、血栓形成等生理过程种都扮演着重要角色, 25%的新生败血症PLT会减少, 且随病情加深而增加减少率[8], 但本研究感染组和非感染组PLT无统计学差异, 可能是由于多种疾病, 如呼吸窘迫综合征、窒息、NEC、DIC 等情况中PLT均会减少, 导致PLT检测的特异性较差。

本研究感染组CD11b、Hs-CRP和CD64显著高于非感染组(t=8.88, P< 0.01; t=22.62, P< 0.01; t=24.79, P< 0.01)。近年来CRP得到越来越广泛的应用。CRP是一种急性时相蛋白, 识别和激活某些影响炎症和防御机制的物质, 在炎症状态下, CRP会发生数十倍的急剧增加, 常作为细菌感染的早期指标。由于受到检测下限的影响, 常规检测难以发现低水平的CRP变化, 通过hs-CRP技术可提高CRP检测能力提高到0.15 mg/L, 因而增强了其临床使用价值[9], 本研究发现感染组hs-CRP显著高于对照组。目前, 不同研究中对于hs-CRP检测灵敏度各不相同, 如以3 mg/L为诊断阈值时, 诊断敏感性在49.3%~96%, 其检测敏感性达64.0%。新生儿感染具有显著的低治疗风险和高风险漏诊特点, 检测的敏感性尤为重要, 而hs-CRP对新生儿的检测敏感性不足, 因此不可将hs-CRP作为新生儿检测的唯一指标。

在正常人群中, CD64主要在单核、巨噬细胞和树突状细胞表面表达, 在中性粒细胞的表达很低。但是, 当细胞受到感染时, CD64在中性粒细胞的表面就会产生高表达的现象。临床上把CD64的高表达作为早产儿出现感染的指标。在一项白血病研究中, 研究者认为, CD64具有良好的敏感性和特异性。本研究CD64的敏感性和特异性分别为0.84和0.90。CD11b是中性粒细胞表面含量最多的一种细胞表面抗原, 接触到细菌后即可迅速增加, 被认为是细菌感染的早期检测指标。围生期高危感染患儿可见中性粒细胞CD11b表达增高, 在对四种白细胞表面标记物CD25、CD45RO、CD11b和CD64的研究结果中显示, 对于极低出生体重儿而言, CD11b在晚发性败血症时同时拥有较高的敏感性和特异性[10], 在最佳临床诊断界值时中性粒细胞CD11b敏感性和特异性分别为91%和87%。本研究发现, CD11b敏感性和特异性分别为0.90和0.98, 均高于CD64, 这对于早产儿感染具有最高的敏感性和特异性。

综上所述, 外周血CD11b阳性细胞对早产儿早期感染的诊断价值高于hs-CPR和CD64阳性细胞, 检测仅需要少量检测样品, 检测时间短。但在进一步的研究中应建立统一的临床检测标准, 为今后推广使用提供理论基础。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
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