引用本文
李鹏宇, 采云, 郗科. 新兵HIV抗体筛查酶联免疫法和金标法的比较[J]. 青海石油, 2018,29(9): 905-906.
[J]. Qinghai Petroleum, 2018,29(9): 905-906.
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新兵HIV抗体筛查酶联免疫法和金标法的比较
李鹏宇1, 采云1, 郗科2
1.100027,武警北京总队医院检验科
2.100089 北京,原武警总医院机关门诊部

作者简介:李鹏宇,本科学历,副主任技师。

关键词: HIV抗体; 酶联免疫法; 金标法; 假阳性
中图分类号:R446.61

艾滋病(AIDS), 又称获得性免疫缺陷综合征, 主要是由艾滋病病毒(HIV)攻击人体免疫系统而引起的[1]。近年来, 我国艾滋病流行趋势正处于上升阶段, 对部队选取健康兵员, 保证战斗力提出了严峻的考验。为此部队投入了大量的人力物力来对新兵进行健康复检工作, 艾滋病的筛查就是其中非常重要的一项内容。实验室诊断HIV感染的常规手段是检测HIV抗体, 以往经典的检测方法是酶联免疫法, 随着技术的发展, 金标法也逐渐被医院和体检中心等机构应用于HIV抗体筛查工作中。笔者对两种方法检测HIV抗体的结果进行比较分析, 以为新兵复检工作提供可靠的检验方法。

1 临床资料
1.1 一般资料

选择武警某部2017年度新兵共9325例为检测者, 其中男9275例, 女50例, 年龄18~21岁, 平均为18.9岁, 检测时间为2017年9— 10月。收集检测者3~5 ml静脉血样本, 离心分离出血清备用。

1.2 方法

1.2.1 仪器与试剂 选用北京金豪公司的ELISA-双抗原夹心法试剂, 仪器为 Anthos2010型酶标仪, 全自动洗板机, 进口10~200 μ l规格的微量移液器, 37 ℃水浴恒温箱。金标法采用厦门英科新创公司的HIV抗体胶体金免疫层析快速诊断试剂。

1.2.2 检测方法 (1)酶联免疫法:严格按照试剂盒中的操作规程进行检测, 使用酶标仪对样品的吸光度(A)值进行测量, 并和所用试剂的临界值(CUT OFF)进行对比, 使用比较得出的S/CO值对检测结果进行判断, 所测定的A 值高于CO值则判断为阳性[2]。阳性标本排除溶血、血清分离不完全等干扰因素, 单独进行复测, 并采用手工洗板, 判定标准不变。(2)金标法严格按照说明书来进行检测和判断结果, 初筛阳性结果同样排除干扰因素进行复测, 标本不合格的重新抽血进行检测。用两种方法分别对9325份标本进行检测, 测试人员有操作经验并相对固定, 试剂批号为同一批号。两种方法复测后的阳性标本送上级确证实验室进行结果确认。

1.3 统计学处理

采用SPSS 12.0统计学软件进行数据处理。计数资料采用χ 2检验, 以P< 0.05为差异有统计学意义。

1.4 结果

酶联免疫法初筛首次阳性标本为18例, 出现假阳性原因分别为洗板机清洗不彻底8例, 严重溶血5例, 血清分离不完全2例。初筛阳性标本排除干扰因素(重新抽血、离心彻底、手工洗板)在使用相同试剂的情况下进行复检, 初筛阳性率0.032%; 金标法首次初筛检测出阳性标本10例, 初筛阳性率0.096%。两种方法的筛查阳性率比较, 差异具有统计学意义(P< 0.05)。由表1可以看出, 酶联免疫法的初筛阳性率较高, 排除干扰后假阳性率为0.021%(2/9325), 金标法假阳性率为0.086%(8/9325), 两种方法对比, 酶联免疫法假阳性率较低, 差异有统计学意义(P< 0.05)。

表1 9325例新兵酶联免疫法和金标法HIV抗体筛查结果(n; %)
2 讨 论

新兵是一个特殊的群体, 具有年轻, 身体健康状况普遍良好的特点, 因此新兵的HIV抗体筛查既要保证检测质量、避免漏检, 又要减少经济消耗, 选择高效、高质量的筛查手段尤为关键。

金标法在进行HIV抗体检测时, 具有敏感性高、快捷、方便等优点, 不需要特殊的仪器设备, 所以卫生队(所)的卫生员经简单培训就能熟练掌握, 适用于平时小批量的标本或远离体系医院的偏远地区使用。不过金标法也具有特异性低、假阳性率高等缺点[3]。新兵入伍集训人员较集中, 检测量较大, 这就对检测方法的特异性和经济性提出较高的要求, 因此金标法不太适用于新兵的HIV抗体集中筛查。

酶联免疫法的特异性及敏感性都相对金标法要高, 且试剂成本低, 可以批量操作, 通量较大, 因此是新兵HIV抗体筛查的首选方法。本实验中我们选用的ELISA试剂为HIV三代试剂盒, 主要检测HIV(1+2)抗体。近年来, 随着HIV检测技术的提高, ELISA方法的HIV四代试剂正逐渐取代HIV三代试剂, 它能在同一个检测系统同时检测HIV(1+2)抗体与P24抗原[4]。HIV感染机体后, 自身各种抗原随着感染时间的延长而先后出现, 其中P24抗原为早期感染的检测指标。P24抗原是HIV的核心蛋白, 主要特点在于急性感染的开始阶段其滴度相当高, 而且其出现早于特异性抗体[5]。比较第三代试剂, 第四代试剂可以大大缩短窗口期, 检测时间提前了8~10 d。P24抗原检测用于HIV感染的早期检测和HIV新近感染的检测都具有积极的意义[6, 7]。酶联免疫法也存在局限性, 比如操作相对复杂, 干扰因素多, 需要各种仪器设备, 且要求操作人员具有一定的专业技能等[8]。

针对上述问题, 我们总结出几点处理措施:(1)制订完整的操作规范, 认真对待工作中的每一个细节, 保证高效率地完成检测工作; (2)选择灵敏度高、特异性好的三代乃至四代试剂, 从而避免由于检测中所用试剂的原因造成假阳性结果和窗口期漏检的发生; (3)先期对工作人员进行培训, 以保证采集血液样本的合格率, 标本处理流程的科学性, 完善试验条件的同一性, 最大限度地提高实验准确率、减少假阳性率。

The authors have declared that no competing interests exist.

参考文献
[1] 郑晓虹, 张玮, 陈安琪, 等. HIV抗原抗体联合检测试剂在高危人群筛查中的应用[J]. 诊断学理论与实践, 2008, 7(2): 168. [本文引用:1]
[2] 李家锋, 何勤, 季福玲, 等. 临床HIV抗体初筛检测中假阳性原因的分析[C]//二十一世纪第三届全国性传播疾病防治学术研讨会论文集. 上海: 第二军医出版社, 2006: 172-173. [本文引用:1]
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[6] 陈尚良, 郑欣, 曾月婷, 等. 第四代HIV抗原抗体检测试剂在血液筛查中的应用[J]. 分子诊断与治疗杂志, 2014, 6(1): 30-32 [本文引用:1]
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[8] 李德武. HIV抗体初筛试验假阳性原因探究及处理措施[J]. 检验医学与临床, 2012, 9(19): 2492-2493. [本文引用:1]