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| 新的白血病相关基因LRP15真核表达载体构建及在K562细胞中的表达 |
| 徐周敏;楼方定;于力;卢学春;杨龙;吕鸣;吕有灵;陈坚;章菲菲 |
| 武警上海总队医院血液科,上海,201103;解放军总医院血液科,北京,100853 |
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| Construction of eukaryotic expression vectors of human LRP15 gene and its expression in K562 cells |
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摘要 目的构建LRP15基因开放阅读框架(ORF)序列的真核表达载体,并观察其在K562细胞中的表达情况.方法采用RT-PCR方法自1例白血病患者中克隆LRP15cDNA片段,将目的基因LRP15克隆入pGEM-T载体中并进行酶切鉴定和DNA序列测定.将鉴定过的DNA片段插入真核质粒pcDNA3.1(+),构建真核表达载体pcDNA-LRP15.脂质体介导法将其转染K562细胞,72 h以RT-PCR方法检测转染细胞中LRP15基因的表达情况.结果酶切鉴定和序列分析证实,重组质粒含有人LRP15基因ORF序列;转染实验表明LR15基因能在K562细胞中表达.结论成功构建LRP15基因真核表达载体,并在K562细胞中获得表达,为进一步研究LRP15基因的功能奠定了基础.
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| 关键词 ：
LRP15基因,
真核表达,
K562细胞
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收稿日期: 2003-08-10
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2003, Vol. 14 
