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| 蛋白激酶Cδ亚型cDNA的克隆及其序列分析 |
| 董(王乐)瑾;李楚彦;朱江;谢文利;晋玉章;赵艳威;孙静 |
| 武警医学院药理学教研室,天津300162;武警广东总队第一支队,广州510030 |
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| Molecular cloning and sequence analysis of recombinant cDNA encoding protein kinase C δ isoform |
| DONG Lijin;LI Chuyan;ZHU Jiang;XIE Wenli;JIN Yuzhang;ZHAO Yanwei;SUN Jing |
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摘要 目的 研究中国仓鼠卵巢上皮细胞是否表达蛋白激酶Cδ亚型.方法 参照GeneBank数据库PKC δ亚型的cDNA序列;通过EMBL-EBI数据库的CLUSTALW,选取种属间同源性最高的序列;利用GENERUNNER软件设计PKC δ亚型的特异引物;RT-PCR扩增CHO细胞PKC δ亚型的cDNA序列;利用AT克隆技术将PKC δ连接到pGEM-T载体上,经蓝白斑筛选,酶切鉴定后测序;Western blotting方法检测CHO细胞中PKC δ亚型.结果 运用RT-PCR和Western blotting技术证实CHO细胞表达PKC δ亚型,并经测序证实.结论 CHO细胞中发现PKC δ亚型的存在,为深入研究PKC δ亚型的结构、功能及与细胞内信号转导通路的关系奠定基础.
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| 关键词 ：
蛋白激酶C,
RT-PCR,
Western blotting,
克隆
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收稿日期: 2006-07-18
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2006, Vol. 17 
