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S100A2全长基因真核表达载体pEGFP-N2-S100A2的构建及其在胃癌细胞系BGC-823中的表达 |
李海军;王孟薇;吴本俨;王卫华;王昌正;朱鸣 |
解放军总医院南楼消化科,北京,100853 |
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Construction of complete S100A2 eukaryotic expression vector and its expression in BGC-823 cell line |
LI Haijun;WANG Mengwei;WU Benyan;WANG Weihua;WANG Changzheng;ZHU Ming |
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摘要 目的 克隆S100A2 cDNA,构建pEGFP-N2-S100A2重组表达载体,转染胃癌细胞系BGC-823,为探讨其对胃癌细胞系的影响奠定实验基础.方法 应用RT-PCR 和DNA 重组技术构建pEGFP-N2-S100A2 融合蛋白表达载体,质粒经测序正确后,用脂质体转染BGC-823 细胞.结果 重组质粒经限制性酶切鉴定得到与S100A2全长基因长度一致(294 bp) 的酶切产物; 测序分析证实,重组质粒中含有一与GenBank 上登录的S100A2基因(NM-005978) 序列完全一致的序列,表明成功地完成了表达载体的构建; 荧光显微镜下可见转染的BGC-823 细胞有绿色荧光蛋白的表达.结论 构建完成真核表达载体pEGFP-N2-S100A2,S100A2基因在BGC-823细胞内成功表达.
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关键词 :
真核载体,
荧光蛋白,
胃癌,
基因转染
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收稿日期: 2007-06-09
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